Les cerfs sont cathéméraux, ce qui signifie que leurs habitudes d'activité peuvent varier en fonction de facteurs tels que l'heure de la journée, la saison et le lieu. Bien que le cerf de Virginie soit généralement plus actif le matin et le soir, il peut également l'être la nuit, en particulier pendant les mois d'été, lorsque le temps est plus chaud et la nourriture plus abondante. Certaines populations de cerfs de Virginie présentent des modèles d'activité nocturne, ce qui signifie qu'elles sont plus actives la nuit.