Les hiboux ont divers prédateurs. Leurs prédateurs varient en fonction de la région et de la taille des espèces de chouettes. Les prédateurs naturels courants des hiboux comprennent des raptages d'oiseaux plus grands comme les faucons et les aigles, ainsi que les prédateurs de mammifères tels que les renards, les marges, les ratons laveurs, les chats sauvages, les loups, les lions de montagne et les grands hiboux à cornes. Dans certains environnements, ils peuvent également être la proie d'oiseaux plus grands comme des aigles dorés ou même de certains reptiles tels que la tortue de claquement d'alligator. D'autres menaces potentielles contre les hiboux peuvent inclure des espèces aviaires plus grandes comme les corbeaux, les goélands ou même les corbeaux qui adoptent parfois des comportements de mobbing. De plus, certaines espèces de serpents représentent le danger de s'attaquer aux nouveau-nés dans le nid.