Les opossums sont les plus étroitement liés aux autres membres de l'ordre des Didelphimorphia, qui comprend tous les opossums, vivants et éteints. Au sein de ce groupe, les opossums sont les plus étroitement liés à la famille des Didelphidae, qui comprend tous les opossums vivants. Parmi les opossums vivants, l'opossum de Virginie (Didelphis virginiana) est le plus étroitement apparenté à tous les autres opossums vivants.