Les Panthers de Floride n'ont pas de prédateurs naturels. Les alligators s'attaquent parfois aux Cubs de Panther en période de sécheresse lorsque les Panthers perdent l'accès à l'eau, ce qui en fait un jeu plus facile. Les humains sont leur seul concurrent sérieux, les tuant intentionnellement et involontairement à travers des frappes automobiles et la perte d'habitat. Les lynx roux s'attaquent parfois à de petits chatons.